Flowcytometri er en metode som kan brukes til å analysere og sortere ulike partikler løst i en væske. Metoden brukes både klinisk, og innenfor medisinsk og biologisk forskning. Partiklene kan ha varierende størrelse, fra hele celler og bakterier, til nukleinsyrer og enkeltpartikler av mindre størrelse. Flowcytometri brukes i klinisk arbeid ved blant annet sykehuslaboratorier til å sortere og telle ulike typer blodceller i pasientprøver.
Flowcytometri er en hurtig, objektiv og kvantitativ metode til analyse av celler i løsning. Metoden gjør det mulig å analysere og telle store mengder partikler, som for eksempel 10,000 celler per sekund.
Cellene må være løst i væske som enkeltpartikler (suspensjon) som føres i en væskestrøm igjennom en dyse (et traktformet rør lignende tuppen på en hageslange). Når enkeltcellene kommer ut av dysen, spres de i dråper som kun inneholder én og én celle. Rett under dysen er en lysstråle, ofte er denne en laser med ulike bølgelengder (typisk 488 nm).
Når cellene sendes én og én gjennom lysstrålen eller laseren detekteres den spesifikke måten lysstrålen spres på eller fluorescensen. Ulike typer partikler og celler vil bøye og spre lyset på forskjellige måter. Denne forstyrrelsen av lysstrålen registreres med ulike detektorer. Disse detektorene måler i hvor stor grad lyset bøyes og spres av hver enkelt celle. Forskjellene gjør det mulig å skille de ulike cellene fra hverande.
Cellene utsettes så for elektrisk ladning. Cellene kan gis enten positiv eller negativ ladning basert på de ulike egenskapene som ble detektert. Etter at cellene har blitt ladet går de forbi defleksjonsplater (plater med høyspenning), én med positiv og én med negativ ladning. Sorteringen gjøres ved at cellene tiltrekkes en av platene basert på hvilken ladning cellen ble gitt. Celler som ikke ble gitt en elektrisk ladning kan sorteres vekk.
Med flowcytometri er det mulig samtidig å måle en rekke forskjellige egenskaper for hver enkelt celle (multiparameteranalyse). Spesifikke typer enkeltceller kan sorteres ut fra en blanding av ulike celletyper løst i væske basert på ulike faktorer som for eksempel form, størrelse og eventuelt fluorescerende egenskaper. Dette er nyttig hvis det for eksempel er behov for å konsentrere opp større mengder av en spesifikk bakterietart som ikke tidligere er dyrket i laboratoriet slik at den kan studeres. Ved bruk av ulike fargemetoder som gir celle fluorescerende egenskaper kan man for eksempel sortere døde og levende celler fra hverandre.
Innenfor immunologien brukes flowcytometri i kombinasjon med avanserte fargemetoder til immunfenotyping. Ved denne metoden identifiseres hvilke typer ondartede celler som er tilstede ved for eksempel leukemi.
Multiparameter flowcytometri kan brukes til å kombinere flere av de ulike sorteringsmetodene som er nevnt og muliggjør beskrivelse av kompliserte forhold mellom cellers aktivering, proliferasjon, differensiering og modning som for eksempel i blod og beinmarg og ved kreft.
Kommentarer
Kommentarer til artikkelen blir synlig for alle. Ikke skriv inn sensitive opplysninger, for eksempel helseopplysninger. Fagansvarlig eller redaktør svarer når de kan. Det kan ta tid før du får svar.
Du må være logget inn for å kommentere.